技術文章
TECHNICAL ARTICLES1993年,比利時布魯塞爾自由大學免疫學家Hamers-Casterman教授以及他的同事們在駱駝(駱駝科,后來研究證實也包括單峰駱駝和羊駝)的血清中發(fā)現(xiàn)了一種與傳統(tǒng)抗體結(jié)構(gòu)不同的新型抗體,這種抗體僅僅由兩條重鏈構(gòu)成,被稱為重鏈抗體(heavy-chainantibody,HCAb)。重鏈抗體的重鏈的可變區(qū)稱為VHH(variabledomainofheavychainofheavy-chainantibody),通過體外重組表達制備的VHH分子質(zhì)量僅僅為15kDa,是傳統(tǒng)抗...
當建立內(nèi)切酶酶切反應體系時有幾個關鍵因素需要考慮。比如如何在正確的反應體系中,加入適量的DNA、內(nèi)切酶和緩沖液,就可以獲得最佳酶切效果。根據(jù)定義,在50μl體系中,1單位的限制性內(nèi)切酶可以在60分鐘內(nèi)*切割1μg的底物DNA。上述酶、DNA與總反應體積的比值可以做為建立反應體系的參考數(shù)據(jù)。但是,目前大多數(shù)科研人員會遵循下表中所列的標準反應條件,使用5-10倍的過量酶切割DNA,這樣有利于克服由于DNA來源不同、質(zhì)量和純度不同而造成的實驗失敗?!皹藴省狈磻w系內(nèi)切酶從冰箱取出后...
FrontierScientific,Inc.(簡稱FSI),創(chuàng)立于1975年,總部位于美國猶他州。自創(chuàng)立之初,F(xiàn)SI即開始為藥物研發(fā)、生物技術、工業(yè)化學、政府和科研機構(gòu)提供研發(fā)和生產(chǎn)所需要的優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務。FSI尤其擅長研發(fā)和制造卟啉、酞菁、高級硼酸(酯)、藥物研發(fā)用小分子中間體和SAR的研究,以及從毫克到公斤級別的先導優(yōu)化,并能夠為客戶提供CRO、FTE或者FFS服務。FrontierScientific,Inc.(FSI)wasfoundedin1975byDr.Bru...
服務簡介無細胞表達系統(tǒng)是一種以外源DNA或mRNA為模板,利用細胞抽提物中的細胞合成機器,蛋白折疊因子及其他相關酶系,通過添加氨基酸和T7聚合酶和能量物質(zhì)來實現(xiàn)蛋白表達的體外系統(tǒng)。其中包括真核無細胞表達系統(tǒng)和原核無細胞表達系統(tǒng)。艾柏森生物優(yōu)勢1.更快得到數(shù)據(jù),僅需1小時即可獲得功能蛋白,而基于細胞的表達系統(tǒng)則需要數(shù)天。2.節(jié)約時間,表達蛋白可以直接用后續(xù)實驗,不需要額外純化。3.更適合蛋白表達,更適用于激酶等毒性蛋白的表達,也可使用經(jīng)過修飾的tRNA來進行標記,在某特定位點摻...
跑電泳是分子生物學實驗的一項基本技術。只要做分子生物學方面的實驗,可能或多或少,或早或晚都要跑跑電泳。跑電泳是分子生物學實驗的一項基本技術。只要做分子生物學方面的實驗,可能或多或少,或早或晚都要跑跑電泳。跑電泳的材料是瓊脂糖,瓊脂糖凝膠電泳實驗常用以DNA切膠回收,DNA分離和用于佐證DNA是否重組、質(zhì)粒等是否切開。今天我們就來聊聊瓊脂糖凝膠電泳實驗的一些小技巧小細節(jié)。1凝膠制作1.1凝膠濃度配制凝膠的濃度據(jù)實驗需要而變,一般在0.8%~2.0%之間,如果一次配制凝膠100m...
細胞轉(zhuǎn)染對初接觸細胞實驗的科研人員而言,是一道難過的坎兒,細胞轉(zhuǎn)染率低的話,你珍貴的細胞可能就只能扔掉了。一、轉(zhuǎn)染的途徑大致可分為物理介導、化學介導和生物介導三類:1.物理介導:電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于通過物理方法將基因?qū)爰毎姆独?.化學介導:方法很多,如經(jīng)典的磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法、和多種陽離子物質(zhì)介導的技術。3.生物介導:方法有較為原始的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)染,和現(xiàn)在比較多見的各種病毒介導的轉(zhuǎn)染技術。理想細胞轉(zhuǎn)染方法,應該具有轉(zhuǎn)染效率高、細胞毒性小等優(yōu)點。病毒介...
枯草芽孢桿菌,是芽孢桿菌屬的一種,廣泛分布在土壤及fubai的有機物中,易在枯草浸汁中繁殖,故名枯草芽孢肝菌??莶菅挎邨U菌的主要優(yōu)勢在于,它是一種嗜溫、好氧、產(chǎn)芽孢的桿狀細菌,常采用人工誘變深層液體發(fā)酵濃縮精制而成。該菌在自然界中廣泛存在,對人畜無毒無害,不污染環(huán)境,能產(chǎn)生多種抗菌素和酶,具有廣譜抗菌活性和*的抗逆能力。它在農(nóng)作物上使用效果非常顯著、穩(wěn)定性強??莶菅挎邨U菌對果樹、棉花、小麥、辣椒、番茄、玉米、水稻、大豆、辣椒等農(nóng)作物上顯示出很好的防病和增產(chǎn)增收效果。目前市場上...
(1)質(zhì)粒的提取(Tiangen質(zhì)粒提取試劑盒):a)挑菌:選取培養(yǎng)板中大小中等的單個菌落,消毒牙簽接種到10ml搖菌管中,其中含有卡那霉素的LB約5ml,37°C,220rpm恒溫搖床中震蕩培養(yǎng)過夜。b)取上述2.0ml培養(yǎng)液,于常溫下12000rpm離心1分鐘,棄上清,干燥沉淀。c)加入250µl溶液P1(配有去RNA酶,4°C保存),渦旋振蕩,*懸浮細菌,不能留有沉淀,否則會影響裂解。d)加入250µl溶液P2,快速上下顛倒8次,常溫靜置3分鐘,...
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