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顯微注射

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顯微操作技術(shù)(Micromanipulation Technique)是指在高倍倒置顯微鏡下,利用顯微操作器
(Micromanipulator),控制顯 微注射針在顯微鏡視野內(nèi)移動(dòng)的機(jī)械裝置,用來(lái)進(jìn)行細(xì)胞或早期胚胎操作
的一種方法。顯微操作技術(shù)包括細(xì)胞核移植、顯微注射、嵌合體技術(shù)、胚胎移植以及顯微切割等。

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更新時(shí)間:2021-07-09
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顯微操作技術(shù)(Micromanipulation Technique)是指在高倍倒置顯微鏡下,利用顯微操作器
(Micromanipulator),控制顯 微注射針在顯微鏡視野內(nèi)移動(dòng)的機(jī)械裝置,用來(lái)進(jìn)行細(xì)胞或早期胚胎操作
的一種方法。顯微操作技術(shù)包括細(xì)胞核移植、顯微注射、嵌合體技術(shù)、胚胎移植以及顯微切割等。

 以細(xì)胞內(nèi)微注射和微灌注技術(shù)為基礎(chǔ)的玻璃針頭(GlassNeedle,精細(xì)的玻璃微量毛細(xì)移液管)的使用,已經(jīng)在越來(lái)越多的實(shí)驗(yàn)生物學(xué)研究領(lǐng)域中成為一項(xiàng)非常普遍的操作方法,比如在體外受精、轉(zhuǎn)基因中等等。描述這些技術(shù)最恰當(dāng)?shù)脑拺?yīng)當(dāng)稱其為---顯微操作,因?yàn)檫@些操作是通過(guò)單個(gè)的或多個(gè)的筒狀玻璃微量移液管、精確的定位裝置(顯微操作器)以及微量注射器或微量灌注器來(lái)在單個(gè)的細(xì)胞上進(jìn)行的。

顯微注射法(microinjection)是利用管尖極細(xì)(0.1至0.5μm)的玻璃微量注射針,將外源基因片段直接注射到原核期胚或培養(yǎng)的細(xì)胞中,然后藉由宿主基因組序列可能發(fā)生的重組(rearrangement)、缺失(deletion)、復(fù)制(duplication)或易位(translocation)等現(xiàn)象而使外源基因嵌入宿主的染色體內(nèi)。這種顯微注射術(shù)的程序,需有相當(dāng)精密的顯微操作設(shè)備,制造長(zhǎng)管尖時(shí),需用微量吸管拉長(zhǎng)器(micropipettepuller),注射時(shí)需有固定管尖位置的微量操作器。這種技術(shù)的長(zhǎng)處為任何DNA在原則上均可傳入任何種類的細(xì)胞內(nèi)。此法已成功運(yùn)用于包括小鼠、魚、大鼠、兔子及許多大型家畜,如牛、羊、豬等基因轉(zhuǎn)殖動(dòng)物。

 

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