技術(shù)文章
TECHNICAL ARTICLES納米抗體制備服務(wù)
安諾倫生物現(xiàn)已擁有較成熟的單域抗體研發(fā)技術(shù)平臺(tái),可為客戶提供各種單域抗體庫(kù)的構(gòu)建服務(wù),包括駱駝和羊駝的免疫庫(kù)和天然庫(kù),以及全合成庫(kù)等各種抗體庫(kù)構(gòu)建,并可根據(jù)客戶需求選擇合適的篩選策略,篩選功能性單克隆單域抗體。
納米抗體測(cè)序服務(wù)
安諾倫生物科技有限公司可以為客戶提供一種卓yue的新型納米抗體測(cè)序服務(wù)。這項(xiàng)服務(wù)基于我們利用的鳥qiang法與抗體數(shù)據(jù)庫(kù)相結(jié)合的技術(shù)“Database Assisted Shotgun Sequencing"(DASS)所搭建的專業(yè)、新型的抗體測(cè)序平臺(tái)。我們可以對(duì)可溶性與功能性納米抗體進(jìn)行VHH結(jié)構(gòu)域序列全覆蓋式的精準(zhǔn)測(cè)序,并且已有數(shù)十次進(jìn)行精確度高達(dá)100%的測(cè)序的成功經(jīng)驗(yàn)。
納米抗體是一種存在于駱駝科動(dòng)物血液中的特殊抗體。與哺乳動(dòng)物中的傳統(tǒng)抗體不同,駱駝科動(dòng)物中的重鏈抗體“heavy-chain antibodies"(HCAbs)缺少一條輕鏈(如圖1綠色結(jié)構(gòu)域),并且由于其大小處于納米級(jí),可以與抗原的單結(jié)構(gòu)域VHH結(jié)合。納米抗體具有與傳統(tǒng)抗體相同的對(duì)目標(biāo)靶點(diǎn)的高特異性、親和性與低毒性。并且,與小分子藥物類似,納米抗體具有傳統(tǒng)抗體所缺少的的對(duì)酶類產(chǎn)生抑制,進(jìn)入受體縫隙的能力。
安諾倫生物科技有限公司可以根據(jù)客戶需要,提供卓yue的新型納米抗體測(cè)序服務(wù)。我們保證對(duì)所有納米抗體可以進(jìn)行準(zhǔn)確率高達(dá)99%以上的測(cè)序。
納米抗體藥物開發(fā)服務(wù)
由于目前臨床上使用的單抗多數(shù)仍為鼠源性單抗,容易產(chǎn)生HAMA反應(yīng)(人抗鼠抗體反應(yīng)),存在一定風(fēng)險(xiǎn),使得這些單抗在臨床治療中的應(yīng)用受到很大的限制。因此,人源抗體藥物開發(fā)成為各大藥企的研發(fā)熱點(diǎn)。
安諾倫經(jīng)驗(yàn)豐富的專家們,建立了基于噬菌體展示技術(shù)的抗體開發(fā)平臺(tái),可承擔(dān)多種納米抗人源化開發(fā)和生產(chǎn)服務(wù),主要包括:基于噬菌體展示技術(shù)的納米抗體的人源化開發(fā),以及相關(guān)的親和力檢測(cè)、穩(wěn)定表達(dá)等服務(wù)。
競(jìng)爭(zhēng)性優(yōu)勢(shì)
· 擁有8年的單域抗體藥物開發(fā)經(jīng)驗(yàn),是的單域抗體服務(wù)供應(yīng)商
· 有此領(lǐng)域經(jīng)驗(yàn)豐富的技術(shù)人員和自主研發(fā)的關(guān)鍵技術(shù)
· 擁有高通量單域抗體篩選的關(guān)鍵技術(shù)專li的du家許可權(quán)
· 擁有單域抗體的酵母表達(dá)及發(fā)酵平臺(tái)
· 提供抗體藥物的一站式篩選平臺(tái),有配套的單域抗體人源化和親和力成熟等抗體工程改造服務(wù)
案例
圖1 單域抗體與標(biāo)準(zhǔn)藥物對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)影響的比較
圖2 單域抗體親和力測(cè)定
抗體芯片定制中心
生物素標(biāo)記法檢測(cè)芯片
生物素標(biāo)記法抗體芯片是將樣品中的蛋白用生物素標(biāo)記,然后與捕獲抗體一起孵育,對(duì)照蛋白加入到樣品中來(lái)監(jiān)測(cè)整個(gè)反應(yīng)過程,包括生物素標(biāo)記和標(biāo)準(zhǔn)化。結(jié)合在芯片上的蛋白利用HRP-鏈霉親和素來(lái)檢測(cè),最后采用化學(xué)發(fā)光或者HiLyte™ Fluor 555-鏈霉親和素來(lái)檢測(cè)信號(hào)。
人L系列1000點(diǎn)抗體芯片 | (同時(shí)檢測(cè)1000種人類蛋白表達(dá)水平) |
人L系列507點(diǎn)抗體芯片 | (同時(shí)檢測(cè)507種人類蛋白表達(dá)水平) |
人L系列493點(diǎn)抗體芯片 | (同時(shí)檢測(cè)493種人類蛋白表達(dá)水平) |
人L系列肥胖因子抗體芯片 | (同時(shí)檢測(cè)182種人類蛋白表達(dá)水平) |
小鼠L系列抗體芯片 | (同時(shí)檢測(cè)308種小鼠蛋白表達(dá)水平) |
大鼠L系列抗體芯片 | (同時(shí)檢測(cè)90大鼠蛋白表達(dá)水平) |
抗體芯片技術(shù)服務(wù)包括:
1.樣品蛋白質(zhì)抽提:
a.實(shí)驗(yàn)對(duì)象為組織樣品,取適量(250~500mg)新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品,加1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑,勻漿后抽提總蛋白。
b.實(shí)驗(yàn)對(duì)象為細(xì)胞樣品,每份樣品取1×106~1×107細(xì)胞,PBS清洗細(xì)胞,去PBS加0.1ml-1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑抽提總蛋白。
c.實(shí)驗(yàn)對(duì)象為血清,則直接進(jìn)入步驟3。
2.蛋白質(zhì)定量:按蛋白質(zhì)定量試劑盒操作說明操作,測(cè)定樣品濃度。
3.細(xì)胞因子抗體芯片封閉和抗體孵育
a.細(xì)胞因子抗體芯片封閉后加入 50-500ug蛋白質(zhì)(若標(biāo)本為血清,通常取100ul血清)與抗體芯片4℃孵育過夜。
b.加入標(biāo)記好的抗體室溫孵育1小時(shí)。
4.抗體芯片檢測(cè)
5.提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告: 包括詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方法和芯片實(shí)驗(yàn)結(jié)果的各種圖表和數(shù)據(jù)比較。
上一個(gè):全基因合成
下一個(gè):實(shí)驗(yàn)室經(jīng)驗(yàn)總結(jié)之: 蛋白質(zhì)相互作用幾種方法比較
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