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噬菌體篩選關(guān)于噬菌體的展示技術(shù)解讀

噬菌體篩選展示技術(shù)經(jīng)近20年的發(fā)展和完善，已被廣泛應(yīng)用于抗原抗體庫的建立、藥物設(shè)計、疫苗研究、病原檢測、基因治療、抗原表位研究及細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)研究等。噬菌體展示系統(tǒng)模擬了自然免疫系統(tǒng)，使我們有可能模擬體內(nèi)抗體生成過程，構(gòu)建高親和力抗體庫。由于噬菌體展示技術(shù)實現(xiàn)了基因型和表型的有效轉(zhuǎn)換，使研究者在基因分子克隆基礎(chǔ)上實現(xiàn)了蛋白質(zhì)構(gòu)象體外控制，從而為獲取具有良好生物學(xué)活性的表達產(chǎn)物提供了強有力手段。另外，噬菌體展示技術(shù)已成為不經(jīng)過免疫獲取特異性人源抗體的新途徑，為獲取對人類和動物疾病...

Quidel Normal Human Serum Complement

QuidelNormalHumanSerumComplement正常人血清補體僅供研究使用。不用于診斷過程。以補體激活片段水平為特征的正常人血清人血清補體旨在明確用于實驗中，以評估體外補體激活或補體細胞毒性水平。在Quidel補體激活測定中已對Bb，C4d，C3a，iC3b和TCC的水平以及總CH50進行了表征。該產(chǎn)品旨在用于專門用于監(jiān)測體外補體激活的實驗環(huán)境。因此，它適用于生物相容性實驗，包括藥物開發(fā)，生物材料測試以及需要監(jiān)測補體作用的其他應(yīng)用。該產(chǎn)品不含EDTA。參考資料...

大腸桿菌的蛋白表達試驗要注意哪些？

蛋白表達技術(shù)已滲透到生命科學(xué)研究的各個領(lǐng)域。越來越多的基因被發(fā)現(xiàn)，其中多數(shù)基因功能不明，利用蛋白表達系統(tǒng)表達目的基因是研究基因功能及其相互作用的重要手段。常見的蛋白表達系統(tǒng)包括大腸桿菌/原核蛋白表達系統(tǒng)、酵母/真核蛋白表達系統(tǒng)、哺乳動物細胞蛋白表達系統(tǒng)、昆蟲細胞蛋白表達系統(tǒng)、植物蛋白表達系統(tǒng)。我們?nèi)绾蔚玫娇扇艿牡鞍?？如果希望得到能行使功能的蛋白，蛋白?yīng)該以可溶形式表達。避免包涵體形成的方法很多，比如選用表達量不高的蛋白表達系統(tǒng)，選擇有助于可溶性表達的融合蛋白表達系統(tǒng)等，使用基...

微生物內(nèi)進行蛋白質(zhì)表達前需要考慮的8件事

在微生物內(nèi)進行蛋白質(zhì)表達是生物科技中的核心技術(shù)。然而，每種蛋白質(zhì)都具有其*的結(jié)構(gòu)性質(zhì)，比如二硫鍵（disulfidebonds）數(shù)量，是否存在疏水區(qū)域(hydrophobicregions)，是否存在跨膜區(qū)域(transmembranedomains)，是否具有糖基化(glycosylations)等翻譯后修飾過程等，所有的這些性質(zhì)都可能決定著蛋白質(zhì)表達過程的難易。在與目的蛋白質(zhì)來源相似的宿主內(nèi)表達蛋白質(zhì)要相對容易些。然而，大多時候，我們需要在與蛋白質(zhì)來源不同的宿主內(nèi)進行蛋白...

多肽合成技術(shù)原理，多肽合成方法解讀

多肽是蛋白質(zhì)水解的中間產(chǎn)物，是α－氨基酸以肽鍵連接在一起而形成的化合物。由兩個氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫做二肽，同理有n個氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫做n肽。通常把三肽以上的叫多肽。多肽合成以固相合成為反應(yīng)原理，在密閉的防爆玻璃反應(yīng)器中使氨基酸按照已知順序（序列，一般從C端-羧基端向N端-氨基端）不斷添加、反應(yīng)、合成，操作終得到多肽載體。固相合成法，大大的減輕了每步產(chǎn)品提純的難度。為了防止副反應(yīng)的發(fā)生，參加反應(yīng)的氨基酸的側(cè)鏈都是保護的。羧基端是游離的，并且在反應(yīng)之前...

抗體制備有關(guān)佐劑的配制講解

有了質(zhì)量好的抗原，還必須選擇適當(dāng)?shù)拿庖咄緩剑拍軐贵w制備質(zhì)量好（特異性強和效價高）的抗體。今天我們來看看佐劑的配制：由于不同個體對同一抗原的反應(yīng)性不同，而且不同抗原產(chǎn)生免疫反應(yīng)的能力也有強有弱，因此常常在注射抗原的同時，加入能增強抗原的抗原性物質(zhì)，以刺激機體產(chǎn)生較強的免疫反應(yīng)，這種物質(zhì)稱為免疫佐劑。佐劑除了延長抗原在體內(nèi)的存留時間，增加抗原刺激作用外，更主要的是，它能刺激網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)，使參與免疫反應(yīng)的免疫活性細胞增多，促進T細胞與B細胞的相互作用，從而增強機體對抗原的細胞免...

單克隆抗體的純化技術(shù)操作步驟

本文由艾柏森生物提供從培養(yǎng)液或腹腔積液獲得的單克隆抗體，不需要純化即可應(yīng)用于日常診斷或定性研究。如果用于免疫標(biāo)記測定，須分離和純化?？捎冒腼柡?、飽和硫酸銨進行沉淀，進行初步濃縮和純化；可用親和層析法進一步純化。一、腹水型單抗的純化在單抗純化之前，一般均需對腹水進行預(yù)處理，目的是為了進一步除去細胞及其殘渣、小顆粒物質(zhì)、以及脂肪滴等。常用的方法有二氧化硅吸附法和過濾離心法，以前者處理效果為佳，而且操作簡便。1、二氧化硅吸附法新鮮采集的腹水（或凍存的腹水），2000r/min15分...

常見的融合蛋白表達標(biāo)簽——總結(jié)

在重組蛋白中，常常將目的蛋白N端或C端與其他特定蛋白、多肽或寡肽標(biāo)簽進行融合表達，形成既能保留天然蛋白的大部分結(jié)構(gòu)，又能實現(xiàn)增溶，防降解，促進分泌，便于純化的功能；本文簡要介紹生物藥研發(fā)生產(chǎn)過程中常見的融合蛋白標(biāo)簽；一、純化標(biāo)簽His標(biāo)簽His標(biāo)簽是當(dāng)前流行的標(biāo)簽蛋白。His標(biāo)簽是指六個組氨酸殘基組成的融合標(biāo)簽，可插入在目的蛋白的C末端或N末端。當(dāng)某一個標(biāo)簽的使用，一是能構(gòu)成表位利于檢測；二是構(gòu)成*的結(jié)構(gòu)特征（結(jié)合配體）利于純化。其特點可總結(jié)為以下幾點：1.標(biāo)簽的分子量小，只...