技術(shù)服務(wù) 抗專一亞型抗體制備

更新時(shí)間：2020-05-09

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技術(shù)簡介

動(dòng)物的免疫過程是在集體多種器官和細(xì)胞的參與下完成的，所以即便是用同一種抗原免疫，在同一個(gè)免疫周期中，受試動(dòng)物針對(duì)同一抗原產(chǎn)生的抗體也存在極大的差別。以人和小鼠為例，機(jī)體內(nèi)存在有IgG, IgA, IgM, IgE 和IgD五種亞型的抗體，其中IgG依二硫鍵的位置不同又分為四個(gè)輕微差異的亞型，稱為同型。在一些免疫學(xué)試驗(yàn)中，為了觀察受試動(dòng)物免疫反應(yīng)所處的階段，常常需要以受試動(dòng)物產(chǎn)生的主體抗體亞型為線索，對(duì)特定亞型的抗體實(shí)現(xiàn)捕獲或標(biāo)記，同時(shí)無需專一性的識(shí)別針對(duì)特定抗原的抗體，這就是所謂的抗專一亞型抗體，它是抗體亞型鑒定的基礎(chǔ)材料。

服務(wù)組合

服務(wù)項(xiàng)目 (Service Items)		周期（月） Time(months)	客戶提供 (Start point)
			純化的單一亞型抗體 purified single isotype antibodies		混合抗體（血清） mixed antibodies (serum)		原核表達(dá)從頭制備 Prokaryotic proteins synthesis de novo		真核表達(dá)從頭制備 Eukaryotic proteins synthesis de novo
抗原制備 antigens preparation	cDNA合成 cDNA synthesis	1~2					另議，時(shí)間與價(jià)格均不包含在以下信息中
	載體構(gòu)建 Vector construction						√	√	√	√
	分離特定亞型并純化 Isolating single isotype antibodies and purification				√
	蛋白表達(dá)與純化 Protein expression & purification						√		√
	酶切回收 Enzyme treatment and recovering		√		√		√		√
免疫階段 Immunization	免疫5只小鼠或兩只兔子 Immunized 5 mice or 2 rabbits	1.5	√		√		√		√
	ELISA效價(jià)檢查 ELISA titer check		√		√		√		√
細(xì)胞融合與篩選 Fusion & Screening		1.5	√		√		√		√
同家族免疫球蛋白正向復(fù)篩（亞克隆階段） Same isotype immunoglobulin positive screening (subcloning)			√		√		√		√
腹水生產(chǎn)（3只小鼠） Ascites production (Injection on 2 mice)		0.5	√		√		√		√
非同家族免疫球蛋白負(fù)篩 Different isotype immunoglobulin negative screening		0.5	√		√		√		√
腹水生產(chǎn)（5只小鼠） Ascites production (Injection on 3 mice)		1	√		√		√		√
純化與檢測 Purification and detection		0.5	√		√		√		√
總周期（月） Total lead time(months)			4~6	6~8	4~6	6~8	5~7	6.5~8.5	>6	>8

注：

請(qǐng)慎重考慮周期事宜，以上時(shí)間僅為理想條件下短周期；

為了縮短試驗(yàn)周期建議考慮自行提供抗原直接免疫做起；

免疫環(huán)節(jié)設(shè)立驗(yàn)收節(jié)點(diǎn)，效價(jià)合格，取脾臟，效價(jià)不合格，終止實(shí)驗(yàn)；

抗體庫構(gòu)建步驟啟動(dòng)之前，至少支付此步驟的50%全款；完成項(xiàng)目，支付尾款。

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